分光光度計是利用分光光度法，通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。不同種類的分光光度計的基本原理相似，都是利用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，通過測量樣品的吸光值，經(jīng)過計算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計的優(yōu)點：
首先，它所采用的制作材料是非常的，這就保證了它的高質(zhì)量。在檢測物質(zhì)的波長的時候，這種儀器有著非常高的度。這樣，它所檢測出來的結(jié)果跟實際情況當(dāng)然就會更加接近了，這對于生產(chǎn)部門保證產(chǎn)品質(zhì)量有非常重大的意義。
第二點就是分光光度計有著非常好的穩(wěn)定性，它所使用的是超大的集成電路，這樣的集成電路對機(jī)子運作的穩(wěn)定性方面有很大的輔助作用。
第三點是分光光度計非常容易操作，一般的人員只要經(jīng)過專業(yè)人員的培訓(xùn)就可以非常自如地操作。
zui后一點是分光光度計的使用壽命很長。包括紫外可見分光光度計等。只要機(jī)子能得到妥善的保養(yǎng)，不惡意地進(jìn)行破壞，一般這種機(jī)子的壽命都比一般的儀器長很多。更重要的是，機(jī)子使用壽命的延長，在很大程度上還可以減少公司或者工廠的支出。
分光光度計時比較常用的也是比較簡單的儀器設(shè)備。比如核酸的定量是使用分光光度計頻率zui高的?？梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的zui高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如：1OD 的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。測試前，選擇正確的程序，輸入原液和稀釋液的體積，爾后測試空白液和樣品液。然而，實驗并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實驗者zui頭痛的問題。靈敏度越高的分光光度計，表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
